轉(zhuǎn)染技術(shù)是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)，它是研究基因表達(dá)調(diào)控，突變分析等的常規(guī)工具。隨著功能研究的興起，其應(yīng)用越來越廣泛。
LeapWal PolyShooter 蛋白轉(zhuǎn)染試劑 P19103可分為兩大類，一類是瞬時轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(轉(zhuǎn)染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個宿主細(xì)胞中可存在多個拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動子和其它調(diào)控元件的分析。一般來說，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-96小時內(nèi)(依賴于各種不同的構(gòu)建)分析結(jié)果，常常用到一些報告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫助檢測。后者也稱穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，外源DNA既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體(episome)存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉(zhuǎn)入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小，大約1/104轉(zhuǎn)染細(xì)胞能整合，通常需要通過一些選擇性標(biāo)記，如來氨丙基轉(zhuǎn)移酶(APH；新霉素抗性基因)，潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶(HPH)，胸苷激酶(TK)等反復(fù)篩選，得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。
LeapWal PolyShooter 蛋白轉(zhuǎn)染試劑 P19103在使用前需要加血清。胎牛血清(FCS)經(jīng)常用到，便宜一點的有馬或牛血清。通常的，血清是一種包含生長因子及其它輔助因子的不確切成分的添加物，對不同細(xì)胞的生長作用有很大的差別。血清質(zhì)量的變化直接影響轉(zhuǎn)染效率。
因此在轉(zhuǎn)染前建議先測(轉(zhuǎn)右)，試出對細(xì)胞生長良好的血清批號，轉(zhuǎn)染時用同一批號的血清，并同時做負(fù)對照(不加轉(zhuǎn)染試劑及外源DNA)以測試細(xì)胞生長是否正常。有些轉(zhuǎn)染技術(shù)如脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染在有血清存在情況下效率很低，因此在轉(zhuǎn)染前要除血清。但有些對此敏感的細(xì)胞如原代細(xì)胞會受到損傷，甚至死亡導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低。
